【筆頭著者紹介】
斉藤通紀君は、京大医学部を卒業し、すぐに大学院に入り、現在博士課程４年。
学生時代から薬理学教室の垣塚彰博士の指導を受けて、ネーチャー、ＪＢＣに
論文を発表するなど華々しく活躍をする。 大学院に入ってから哺乳類オクル
ディンの同定に大きく貢献した後、オクルディンのノックアウトを癌研の野田
哲生博士の指導のもと一年もかからずに成功させた。 ５月１６日に京都の
呉服問屋のお嬢様と結婚し、公私ともに充実している。 浜田省吾の熱狂的フ
ァン。 指導教官である月田承一郎と同じ灘中、高の卒業で、同じくらい騒々
しいのがのがタマにキズか？！
タイトジャンクションに存在する内在性膜蛋白質が本当に
オクルディンだけか？ この疑問に答えるもっとも単純な
方法は、オクルディン遺伝子をノックアウトすることです。
我々は、世界に先駆けて、マウスオクルディンの遺伝子
に成功したので、その時から、オクルディン遺伝子のノッ
クアウトを野田博士と共同で始めました。 左図にあるよ
うに、通常の方法でターゲッティングベクターを作製し、
ＥＳ細胞でオクルディンの片方のアリルを破壊しました。
そこで、ネオの濃度を上げるという方法で、両方のアリル
のオクルディン遺伝子を壊したＥＳ細胞を得ることに成功
しました。
このＥＳ細胞を左図にあるように、旋回培養によりエンブリオボ
ディーを作製することにより、それを取り囲む上皮細胞に分化さ
せました。
その上皮細胞を凍結切片にして、それぞれの抗体で染め
てみると、左図にあるように、ＺＯ−１の分布は影響を
受けないのに、オクルディンだけが消えているという不
思議な結果を得ました。 そこで、この上皮を凍結割断
レプリカ法で観察してみると、驚いたことに、きわめて
よく発達したタイトジャンクションのネットワークが観
察できました。 これらの事実は、オクルディン以外に
タイトジャンクションを形成する膜蛋白質が存在するこ
とを示していました。 この仕事が次のクローディンの
発見への導火線となりました。